La Porta Maestra est située sur le côté ouest de la fortification adjacente à la mer. Sa construction est impressionnante et suit le style architectural dit toscan, se rapprochant plutôt de l'esthétique des portes monumentales urbaines. Elle fut construite en pierre calcaire gris et son ouverture est flanquée de deux demi-colonnes et un linteau, où est gravé le nom du Luca Michiel, Provéditeur Général du Royaume de Crète (Provisor Generalis Regni Cretae), sous la direction duquel a eu lieu a première phase de construction de la forteresse de Spinalonga (1579-1584). Cette porte constitue l'entrée officielle dans la forteresse de Spinalonga non seulement lors de l'époque vénitienne mais aussi dans la période Ottomane et lors du fonctionnement de l’hôpital des lépreux.